¿Cuál es la química involucrada en el análisis de los niveles de vitamina D a partir de una muestra de sangre?

Si miramos algunos artículos de investigación recientes, parece que LCMS (espectrometría de masa de cromatografía líquida) y sus variantes son los métodos más comunes. La cromatografía líquida generalmente tiene un cilindro con una “fase sólida” de algún tipo de resina que parece arena / perlas que ralentiza las moléculas que pasan a través de ellas y las separa cuando se agrega la fase móvil. La “fase móvil” es una solución de líquidos definida con precisión (generalmente con sus relaciones cambiantes a lo largo del tiempo, como una mezcla de agua: metanol con fracciones de agua en aumento, que aumentan la polaridad).

Después de que la muestra pasa a través de los tubos LC, va a un instrumento espectrómetro de masas que ioniza (haciendo que tengan cargas, usualmente cargas positivas) los compuestos químicos separados y luego los inserta en un campo magnético que los separa por tamaño. Desde el tiempo de retención de LC (cuánto tiempo tardó en salir la molécula del cilindro, que es algo que dice sobre su polaridad) y los datos de MS en la masa de los compuestos, los investigadores pueden calcular con diversos grados de precisión qué sustancias químicas eran en la muestra, incluidos varios metabolitos de vitamina D.